细胞毒性试验-细胞毒性试验方法-中科检测
发布:2023-06-01 08:54,更新:2024-11-21 08:00
细胞毒性试验是一种生物学试验,用于测量细胞或生物材料的毒性。这种试验通常用于评估化学品、药物或其他污染物的毒性对细胞或组织的影响。细胞毒性试验通常涉及将测试物质与细胞或组织混合,并在一定时间后观察其影响。通常使用的细胞类型包括哺乳动物细胞、酵母细胞和细菌细胞等。
细胞毒性试验方法主要有以下几种:
MTT检测法:MTT检测法是利用MTT作为电子接受体,经线粒体内琥珀酸脱氢酶的作用还原为紫蓝色formazan,而用量、细胞密度、培养时间等因素都会影响formazan的生成。
CCK-8检测法:CCK-8检测法通过检测受试样品对体外培养细胞的毒性,从而评价受试样品的毒性,为毒性测试提供依据,是一种基于细胞增殖的细胞毒性检测方法。
荧光素发光法检测(ATP发光法):荧光素发光法检测(ATP发光法)基于受试样品中ATP的发光强度,与标准品比较,从而确定受试样品的毒性。
LDH法检测:LDH法检测是利用谷氨酰半胱氨酸合成酶(GST)对细胞膜通透性损伤程度检测方法,GST是细胞内重要的抗氧化酶,其含量与细胞活力密切相关。
细胞毒性试验流程主要包括以下步骤:
预实验:收集对数生长期细胞,根据细胞扩增传代时的细胞生长速度同比例计算出细胞生长84小时后汇合度达到****时的细胞铺板密度,然后以之作为中心密度,以1.25倍为梯度,往前/往后各梯度稀释4个密度,种到实验所用类型的细胞板中。
实验组:将细胞接种到96孔细胞板中,设置空白对照组和阳性对照组,然后加入毒性物质培养一段时间。
检测OD值:加入CCK8试剂,培养一定时间后,使用双波长进行OD值检测。
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