动物骨髓细胞微核试验-动物骨髓细胞微核试验方法-中科检测
动物骨髓细胞微核是指存在于骨髓细胞中的一种颗粒,大小相当于细胞直径的1/20到1/5,呈圆形或杏仁状,其染色与细胞核一致,在间期细胞中可以出现一个或多个。动物骨髓细胞微核试验是一种检测染色体畸变或评价化学物质诱导染色体损伤的实验方法。
下面是动物骨髓细胞微核试验方法的步骤:
选择实验动物,一般用小鼠,体重在20-24克,雌雄均可。每组动物10只可设3-4个剂量组,同时设阴性对照组和阳性对照组。
染毒推途径依受试物定,选择与人时间接触方式相似的方式。染毒剂量以LD50的1/5-1/50为好。
骨髓细胞微核分析片准备:迅速取胸骨及部分肋骨用刀片剔除肌肉组织及表面结缔组织,沿胸骨剪掉多余肋骨,用滤纸或纱布将胸骨擦净。取载波片,标记后,用滴管取小牛血清在载波片一端滴一滴小牛血清。剪去骨骺端,用弯止血钳将骨髓挤至盛有一-滴小牛血清的玻片上,混匀,用推片将其推成薄厚均匀的片子、自然干燥。
固定:片膜干后用甲醇固定15min,晾干。
染色:干燥后用吸管吸取10%Giemsa染液滴满载玻片,染色10-15min。染色完毕,自来水冲洗载波片背面,干后镜检。
结果观察与计算:先于低倍镜下选择细胞分布均匀、染色均匀,细胞无损区域,再在油镜下计算500个嗜多染细胞的微核率。
动物骨髓细胞微核试验中,试验流程主要包括以下几个步骤:
骨髓液的制备和涂片。
动物处理和骨髓细胞制备。
微核试验。
数据分析。
发布时间:2024-11-08
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